據搜狐資訊網(wǎng)2011年7月27日訊 人血清白蛋白（HSA）是一種極為重要的醫藥蛋白。在臨床上，HSA主要用于血液透析、利尿劑抗性浮腫和一些燒傷或者外傷導致的缺血等的治療。在工業(yè)上，HSA主要作為其它醫藥蛋白質(zhì)產(chǎn)品的保護劑和載體。HSA的市場(chǎng)需求量大，每年約需要500噸，其市場(chǎng)價(jià)值可達15億美元。由于血漿來(lái)源的HSA存在著(zhù)被病原物（如艾滋病毒、乙肝病毒等）污染的風(fēng)險，采用基因工程方法生產(chǎn)重組HSA（rHSA）越來(lái)越受到人們的重視。
　　采用植物細胞不僅可以完全避免人和動(dòng)物來(lái)源的病原物污染，并且具有生長(cháng)周期短，生產(chǎn)成本低廉等優(yōu)點(diǎn)，所以采用植物懸浮細胞重組蛋白表達系統生產(chǎn)rHSA是一個(gè)非常有吸引力的研究方向。但是，長(cháng)期以來(lái)植物懸浮細胞表達系統存在的主要問(wèn)題在于其重組蛋白產(chǎn)量較低，一般均不超過(guò)總可溶性蛋白的0.1%，產(chǎn)量大部分在1 μg/mL左右。
　　中山大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院與中國科學(xué)院西雙版納熱帶植物園合作培養的博士研究生孫僑陽(yáng)等人在導師徐增富研究員的指導下，與英國John Innes Centre的George P. Lomonossoff教授和香港中文大學(xué)姜里文（Liwen Jiang）教授合作，成功地建立了穩定、高效表達rHSA的轉基因植物細胞系。該研究小組采用基于非復制型缺失豇豆花葉病毒（cowpea mosaic virus，CPMV）RNA-2構建的高效表達載體系統pEAQ-HT，該表達載體含有可抑制基因沉默的番茄叢矮病毒（tomato bushy stunt virus, TBSV）基因P19；同時(shí)利用大麥的半胱氨酸蛋白酶前體（proaleurain）的信號肽與rHSA融合，將rHSA蛋白分泌到植物細胞培養基中。采用農桿菌介導的轉化方法獲得了穩定表達rHSA的轉基因煙草BY-2細胞系。研究發(fā)現，在pH 8.0的植物培養基培養轉基因BY-2細胞可顯著(zhù)減少rHSA的降解，與在常規的pH 5.8的植物培養基中相比rHSA的產(chǎn)量可提高一倍，達到22.1μg/ml。
　　該研究還發(fā)展了一種簡(jiǎn)單高效的從植物懸浮細胞培養基中純化rHSA的方法，包括70度處理培養物上清、連續兩步柱層析和超濾脫鹽，可獲得純度達95%以上的rHSA，得率達到48.4%?；|(zhì)輔助激光解析電離飛行時(shí)間質(zhì)譜（MALDI-TOF MS）分析和Edman蛋白質(zhì)N-端測序分析結果顯示，從轉基因植物細胞所得到的純化rHSA與人血清來(lái)源的HSA完全一致。
　　該研究成果將進(jìn)一步推動(dòng)采用轉基因植物懸浮細胞表達系統生產(chǎn)rHSA等重組醫藥蛋白的相關(guān)研究。該研究結果近期已在國際學(xué)術(shù)期刊Journal of Biotechnology在線(xiàn)發(fā)表。該研究得到了國家高技術(shù)研究發(fā)展計劃（“863”計劃，2007AA02Z102）的資助。