超濾技術(shù)分離制備小麥蛋白肽項目通過(guò)鑒定
2014-05-17 16:24:53
admin
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據中國生物技術(shù)信息網(wǎng)2008年9月2日訊 日前，由江南大學(xué)承擔的小麥蛋白肽制備新技術(shù)通過(guò)了教育部科技發(fā)展中心組織的鑒定。據悉，本項目以小麥面筋蛋白為原料，采用現代生化分離手段結合酶技術(shù)對小麥面筋蛋白中的酶解產(chǎn)物進(jìn)行分離提取、富集純化，并對其生物學(xué)特性進(jìn)行研究，提出以小麥面筋蛋白為原料深度開(kāi)發(fā)具有明確阿片活性和氨基酸序列的小麥蛋白功能肽的新思路，為提高小麥面筋蛋白的利用率提供了新的方法，填補了國內在這一領(lǐng)域的空白。
項目采用堿性蛋白酶、胃蛋白酶、復合蛋白酶（胃蛋白酶＋胰蛋白酶）水解制備得到了三種面筋蛋白酶解物（AWGH、PWGH和PPWGH）經(jīng)豚鼠回腸離體檢定和NG108-15細胞生物學(xué)檢定，均具有較好的阿片活性，其IC50值分別為1.21±0.25、1.57±0.21和1.29±0.38mg蛋白/mL。AWGH對腺苷酸環(huán)化酶（AC）的活性具有刺激作用，而PWGH和PPWGH則對AC的活性具有抑制作用，其AC抑制率分別為39.66%和50.13%。AWGH和PPWGH經(jīng)過(guò)特定離子交換樹(shù)脂脫鹽處理和超濾處理后，所得小麥面筋蛋白源阿片肽蛋白質(zhì)含量提高到90%以上，且阿片活性有較大的提高，AWGH和PPWGH的IC50值分別約減小至處理前的1/2和1/3。通過(guò)凝膠過(guò)濾色譜、半制備RP-HPLC和RP-HPLC分離純化，從AWGH中得到一個(gè)具有較強阿片活性的組分AWGH-C14-1，從PPWGH中得到兩個(gè)具有較強阿片活性的組分PPWGH-c4-1和PPWGH-c10-2，其氨基酸序列分別為L(cháng)SPHK、GCKSPH和APSAPT。